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肉制品中總脂肪的測(cè)定
本篇文章介紹了一種簡(jiǎn)單可靠的肉制品脂肪測(cè)定方法。樣品用酸水解儀 H-506 進(jìn)行水解。索氏提取使用脂肪萃取儀 E-500 進(jìn)行。在萃取物干燥至恒定重量后，按重量計(jì)算總脂肪含量。使用水解儀 H-506 和脂肪萃取儀 E-500 提高了樣品處理量。
設(shè)備 水解儀 H-506 脂肪萃取儀 E-500 均質(zhì)儀 B-400 分析天平 (精度 ± 0.1 mg) 真空烘箱 玻璃砂芯支架 化學(xué)品及試劑 化學(xué)品及試劑： 石英砂，粒度 0.3-0.9mm 硅藻土? 545 鹽酸 4mol/L 石油醚 40-60 乙醚 為了安全操作，請(qǐng)注意所有相應(yīng)的 MSDS。 樣品： 熟腸，申報(bào)脂肪含量27.46g/100g(+/-0.595 g/100g) 香腸，申報(bào)脂肪含量 20g/100g 碎牛肉，申報(bào)脂肪含量 13g/100g
過程 測(cè)定脂肪包括以下步驟： 樣品均質(zhì) 用 4 M HCl 水解樣品，使脂肪游離出來 索氏提取脂肪 脂肪含量計(jì)算 3.1 樣品均質(zhì) 將樣品用均質(zhì)儀 B-400 均質(zhì)一次，持續(xù) 2 秒 3.2 酸水解 準(zhǔn)備玻璃砂芯 添加約 20g 石英砂放入玻璃砂芯底部，將玻璃砂芯輕輕敲在桌面上，使其壓實(shí) 添加約 2 克硅藻土，用勺子均勻涂抹 在樣品管中放入 2 克硅藻土 在樣品管中加入 10 克均質(zhì)后的樣品，并準(zhǔn)確稱量樣品重量 加入 50 毫升鹽酸(4M)，混勻樣品管形成懸浮液 再加入 50 毫升鹽酸(4M)，確保將所有的樣品從玻璃壁上沖洗完全 預(yù)熱 H-506 10 分鐘 將樣品管放入儀器中 連接吸氣管，啟動(dòng)真空泵 當(dāng)一個(gè)位置開始沸騰時(shí)，將加熱降低 2 檔 每個(gè)位置恒定加熱沸騰將樣品酸水解 30 分鐘 在酸水解結(jié)束時(shí)，向每個(gè)樣品管中加入 50mL 溫水 關(guān)閉加熱，將樣品管提升起來后進(jìn)行抽濾樣品 緩慢加入至少 400mL 水來清洗每個(gè)樣品管，洗滌直到達(dá)到中性 pH 值 從水解儀 H-506 中取出玻璃砂芯。 用pH試紙?jiān)谏靶镜撞繖z查 pH 直到中性 用刮刀攪拌硅藻土層(不要接觸到石英砂層)使樣品拌均勻 用濾紙小心地擦拭刮刀，并將濾紙一并放入玻璃砂芯中 在真空烤箱(100°C/200 mbar 下 2 小時(shí))，烘箱(100°C 下 4 小時(shí))干燥玻璃砂芯 不建議在高溫下快速干燥，因?yàn)橹驹?105°C 以上的溫度下會(huì)分解 讓玻璃砂芯在干燥皿冷卻至室溫 在玻璃砂芯最上方鋪一層石英砂(20克)，防止硅藻土在萃取過程中被沖起 3.3 索氏提取脂肪 3.3.1 準(zhǔn)備加熱溶劑杯 必須使用干燥和清潔的燒杯進(jìn)行索氏提取。在 102°C 下烘干至少 30 分鐘。讓它們?cè)诟稍锩笾欣鋮s至室溫至少 1 小時(shí)，提取前記錄準(zhǔn)確的燒杯重量。 索氏萃取 將裝有樣品的玻璃樣管放入提取室，將液位傳感器調(diào)整到樣品高于樣品 1-2cm (見圖1)。將溶劑直接倒入燒杯，放在相應(yīng)的加熱板上。關(guān)閉防護(hù)罩。(溶劑也可從上方冷凝器口中進(jìn)行添加) 按 表1 所列參數(shù)，激活所選的位置，打開冷卻水或接通冷水機(jī)，啟動(dòng)儀器。 ▲圖1：調(diào)整索氏提取的液位傳感器 表1：脂肪萃取儀 E-500 索氏提取的參數(shù) 步驟 參數(shù) 加熱等級(jí) [-] 溶劑 石油醚/ 乙醚 萃取 20 循環(huán) 5 - 63 淋洗 5 min 5 - 63 智能干燥 on4 - 溶劑體積 [mL] 100 3.3.2 干燥提取樣品 將含有樣品的燒杯放入烘箱中，在 102°C 下烘干恒重。讓燒杯在干燥皿中冷卻到室溫至少 1 小時(shí)，并記錄最后重量。 確保抽提前后燒杯在干燥器中的冷卻時(shí)間相同，燒杯溫度的差異會(huì)造成結(jié)果偏差。 3.4 計(jì)算 結(jié)果根據(jù)公式計(jì)算脂肪的百分比 （1） % Fat：樣品中的脂肪含量 mTotal：燒杯+提取物重量 [g] mBeaker：空的燒杯重量 [g] m樣品：樣品重量 [g]
結(jié)果 測(cè)定的脂肪含量與申報(bào)的樣品的規(guī)定值相符。根據(jù)所使用的溶劑類型，脂肪含量會(huì)有微小的差異。這是因?yàn)槿軇O性對(duì)萃取過程中傳質(zhì)的影響。結(jié)果如表2 - 7所示。 表2：測(cè)定熟腸(規(guī)格：27.46±0.60 g/100g)的脂肪含量，用石油醚 40/60 萃取 m樣品 [g] m燒杯[g] mtotal[g] % Fat 樣品 1 3.4465 110.7764 111.7338 27.78 樣品 2 3.4584 110.8143 111.7797 27.91 樣品 3 3.2385 110.2852 111.1879 27.87 平均值 27.86 SD 0.07 RSD [%] 0.25 表3：用乙醚提取熟腸(規(guī)格:27.46±0.60 g/100 g)測(cè)定脂肪含量 m樣品 [g] m燒杯[g] mtotal[g] % Fat 樣品 1 3.5497 110.0478 111.0399 27.95 樣品 2 3.5504 110.8537 111.8485 28.02 樣品 3 3.6765 111.1559 112.1926 28.20 平均值 28.06 SD 0.13 RSD [%] 0.46 表4：測(cè)定香腸的脂肪含量(規(guī)格:20g/100g)，用石油醚 40/60 提取 m樣品 [g] m燒杯[g] mtotal[g] % Fat 樣品 1 4.4545 113.1815 114.1887 22.61 樣品 2 4.4867 110.9212 111.9420 22.75 樣品 3 4.5070 113.9888 115.0054 22.56 平均值 22.64 SD 0.10 RSD [%] 0.45 表5：測(cè)定熟腸(規(guī)格：27.46±0.60 g/100g)的脂肪含量，用石油醚 40/60 萃取 m樣品 [g] m燒杯[g] mtotal[g] % Fat 樣品 1 4.8694 111.1307 112.2417 22.82 樣品 2 4.4356 111.0507 112.0589 22.73 樣品 3 4.4790 111.3114 112.3310 22.76 平均值 22.77 SD 0.04 RSD [%] 0.19 表6：測(cè)定牛肉末的脂肪含量(規(guī)格:13克/100克)，用石油醚 40/60 萃取 m樣品 [g] m燒杯[g] mtotal[g] % Fat 樣品 1 5.1349 111.1593 111.8055 12.58 樣品 2 5.2429 110.8860 111.5433 12.54 樣品 3 5.1339 111.3167 111.9520 12.37 平均值 12.50 SD 0.11 RSD [%] 0.88 表7：測(cè)定牛肉末的脂肪含量(規(guī)格:13克/100克)，用乙醚 40/60 萃取 m樣品 [g] m燒杯[g] mtotal[g] % Fat 樣品 1 5.0079 110.4678 111.1042 12.71 樣品 2 5.0111 111.2665 111.8964 12.57 樣品 3 5.0529 111.3072 111.9396 12.52 平均值 12.60 SD 0.10 RSD [%] 0.79
結(jié)論 使用水解儀 H-506 和脂肪萃取儀 E-500 測(cè)定肉類產(chǎn)品中的脂肪提供了可靠且可重復(fù)的結(jié)果。結(jié)果與申報(bào)值一致，具有較低的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)。使用脂肪萃取儀 E-500 進(jìn)行索氏萃取，20 個(gè)循環(huán)在大約 70 分鐘內(nèi)完成，對(duì)比傳統(tǒng)索氏節(jié)約大量的時(shí)間。如果對(duì)該脂肪萃取儀感興趣，可聯(lián)系我們進(jìn)行更多了解。
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