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背景介紹

DRUG-seq ，全稱Digital RNA with pertUrbation of Genes (DRUG)-seq，是一種新型高通量藥物篩選技術(shù)。高通量篩選（HTS）是苗頭化合物發(fā)現(xiàn)的重要手段之一，而新型 HTS 平臺 DRUG-seq 是基于 RNA-Seq 的技術(shù)原理，通過研究轉(zhuǎn)錄組變化來篩選苗頭化合物。和傳統(tǒng) RNA-Seq 的高成本和低通量不同，DRUG-seq 可在微孔板中開展實驗，極大地降低成本和提高通量，同時可得到與 RNA-Seq 同樣準確的結(jié)果。

圖1. DRUG-Seq技術(shù)

DRUG-seq技術(shù)最早于2018年，由Ye等人在Nature Communication上發(fā)表，DRUG-seq能夠以較低成本實現(xiàn)對大量化合物的轉(zhuǎn)錄組分析，為藥物研發(fā)提供了有力工具。2022年Li等人介紹了 DRUG - seq 平臺在神經(jīng)科學藥物研發(fā)中的應(yīng)用，通過嚴格測試和開源分析流程，展示了其高重復性和解析化合物作用機制的能力，并以精神分裂癥治療藥物研發(fā)為例，闡述了該平臺如何助力藥物研發(fā)項目。Ye和Li在研究中，均使用到了納升級液體處理系統(tǒng)Echo Liquid Handler，幫助進行化合物的添加與RNASeq反應(yīng)體系的配置。

納升級液體處理系統(tǒng)Echo

● 采用聲波能量進行液體轉(zhuǎn)移，避免使用吸頭進行接觸式移液，避免了吸頭的使用與交叉污染；

● 單次轉(zhuǎn)移液滴2.5或25納升，可采用更小的反應(yīng)體系，減少實驗試劑的使用；

● 每秒可完成300-500次液滴的轉(zhuǎn)移，1塊184孔板100納升/孔的液體添加，3分鐘即可完成；

● 采用聲波進行非接觸式移液，在高通量的藥篩篩選過程中，可從母孔直接進行梯度稀釋，獲得更好的IC50值。

圖2. Echo與Echo移液原理

圖3. 傳統(tǒng)IC50實驗(左)與Echo IC50實驗(右)對比

DRUG-Seq與自動化液體工作站

圖4. DRUG-Seq自動化實驗流程

DRUG-Seq實驗流程，操作步驟多、耗時長。使用Biomek自動化液體工作站和Echo納升液體處理系統(tǒng)，能夠解放人力、提高效率：

● Biomek完成前期的細胞鋪板、細胞換液、細胞傳代，實驗板準備工作；

● Echo進行化合物添加；

● Biomek添加細胞裂解液，Echo添加特異標簽，反轉(zhuǎn)錄試劑；

● Biomek將產(chǎn)物合并，建庫。

自動化在 Drug - Seq 中的優(yōu)勢

● 提高效率，自動化設(shè)備可以同時處理大量樣本，快速完成細胞培養(yǎng)和化合物篩選，縮短整個實驗周期；

● 提高準確性和重復性，自動化操作減少了人為因素的干擾，使得每個樣本的處理和分析條件更加一致。在不同實驗室或不同批次的實驗中，自動化流程能夠保證實驗結(jié)果的重復性，這對于驗證藥物反應(yīng)相關(guān)的生物標志物等研究至關(guān)重要；

● 降低成本，雖然自動化設(shè)備投資較大，但由于提高了效率、減少了錯誤導致的重復實驗，尤其是聲波移液系統(tǒng)Echo，在使用化合物和反應(yīng)體系配置時能夠做到納升級移液，因此總體成本會降低。

參考文獻：

Ye, C. et al. DRUG-seq for miniaturized high-throughput transcriptome profiling in drug discovery.Nat Commun.9, 4307 (2018).Jingyao Li. et al. DRUG-seq Provides Unbiased Biological Activity Readouts for Neuroscience Drug Discovery. ACS Chem. Biol. 2022, 17, 1401?1414